生物實驗報告（精選22篇）

　　在不斷進步的時代，報告的使用頻率呈上升趨勢，報告具有語言陳述性的特點。在寫之前，可以先參考范文，以下是小編為大家整理的生物實驗報告，僅供參考，大家一起來看看吧。

　　生物實驗報告 1

　　一、實驗目的

　　1.初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。

　　2.探索淀粉酶是否只能催化特定的.化學反應。

　　二、實驗原理

　　淀粉和蔗糖都是非還原糖，它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖，還原糖能夠與斐林試劑發生氧化還原反應，生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

　　用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。

　　三、材料用具

　　滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網、酒精燈、燒杯、質量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑

　　四、實驗過程

　　（見書Ｐ47）

　　五、討論

　　1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么？

　　２.兩支試管保溫時,為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?

　　3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的？

　　生物實驗報告 2

　　目的：

　　1、學會提取和分離葉綠體中色素的方法。

　　2、比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點及與光合作用的關系

　　二、理論知識：

　　1、光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接觸，使色素溶解在有機溶劑中。

　　2、葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液（脂溶性強的有機溶劑）中的溶解度不同，因而隨層析液的擴散速度也不同。

　　三、材料：

　　取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液（20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合）、二氧化硅、碳酸鈣。

　　四、步驟

　　1、提取色素：

　　2、制備濾紙條：

　　五、實驗心得

　　生物學是一門實驗科學。生物新課程倡導面向全體學生、提高生物科學素養和探究性學習的課程理念。其中探究學習是讓學生在主動參與的過程中進行學習，讓學生在探究問題的活動中獲取知識，了解科學家的工作方法和思維方法，學會科學研究所需要的各種技能，領悟科學觀念，培養科學精神。這種學習的方式的中心是針對問題的探究活動，當學生面臨各種讓他們困惑的問題時，他就要想法尋找答案。

　　在解決問題時，要對問題進行推理、分析，找出問題解決的'方向，然后通過觀察、實驗來收集事實，通過對獲得的資料進行歸納、比較、統計分析，形成對問題的解釋。最后通過討論和交流進一步澄清事實，發現新的問題，對問題進行更深入的研究。

　　在此背景理念依據下，在教學中教學模式也將發生根本的改變，生物課將更多地開展學生的試驗、討論、交流等活動。引導學習教學模式就是在這種背景下構建的。具體的模式結構：問題——閱讀、實驗——分析、推理、歸納、討論——結論。

　　在運用這種模式的過程中我有下面幾點感觸：

　　1、在教師的引導下學生可帶者問題去閱讀、分析、討論資料，達到解決問題的目的。比如：在學習〈空中飛行的動物〉時，教師可這樣引導學生；想一想，我們人要想在天空自由自在的飛翔必須先解決什么問題？

　　學生思考后說；一是，解決了動力問題。二是，解決了地心引力問題。教師隨后提出問題：鳥是如何解決這些問題的？引導學生思考，讓學生帶著問題去看書、閱讀、討論、交流、的出結論。這樣既可提高學生的學習興趣，改變學習方式，又符合新課程的要求。

　　2、合理開發的有效地利用一切可以利用的課程資源是實現課程目標，轉變學生學習方式的關鍵條件。知識、技能、經驗、活動方式方法等都是課程資源。在學習〈水中生活的動物〉時，對于生活在我這些地方的學生來說，對水中的動物了解不多，而且上課時還不能做試驗，學生缺少感性的認識，這時教師就要引導學生開發自己已有的課程資源。如：學習魚鰭的作用時引導學生想想：獨槳船和雙槳船他們的槳各起什么作用？在學習魚兒離開水為什么會死？教師可引導學生回憶：頭發在水中水什么樣的？從水中出來時又是什么樣的？這樣就很容易理解知識，解決了問題。

　　3、信息化是當今世界經濟和社會發展的大趨勢。新課程注重現代信息技術與生物新課程的整合。這樣可有效地應用數字化的優勢達到學習目標。教師用編制成的演示文稿、多媒體課件來引導學生學習或作為學生自主學習的資源。

　　在課程學習中，利用諸多的文字處理、圖形圖像處理、信息集成等工具，讓學生對課程學習內容進行重組、創作，不僅使學生獲得知識，而且能夠幫助學生建構知識。但是，教師在制作多媒體課件時，把每個知識點、每個環節設計的過于完美，在教師的引導下學生很簡單的就可掌握知識，完成教學任務。但也存在著弊端，這就是學生的自主學習不到位，在獲得知識的過程中缺少自主探究的過程。這個問題就是我發現的問題和努力改進的方面。

　　生物實驗報告 3

　　一、實驗名稱：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞

　　二、實驗材料：

　　顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。

　　三、實驗步驟：

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實驗臺上。

　　2、對光：轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。

　　3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。

　　4、觀察：調節粗準焦螺旋，把所要觀察的.洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。

　　5、左眼向目鏡內看，同時轉動粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。

　　四、使用注意事項：

　　1、取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂,左手托住鏡座，輕拿輕放。

　　2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。

　　3、切忌一面從目鏡進行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。

　　4、在高倍鏡下調節焦距時，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。

　　5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。

　　五、實驗原理：

　　利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　六、創新點：

　　在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片，以供學生操作、觀察，增加了學生動手實驗的時間，使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。

　　生物實驗報告 4

　　考點提示：

　　(1)為何要選新鮮的肝臟?因為在不新鮮的肝臟中，過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。

　　(2)該實驗中所用試管應選較粗的還是較細的?為什么?應選用較粗的，因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛生香的復燃。

　　(3)為何要選動物的肝臟組織來做實驗，其他動植物的組織的研磨液能替代嗎?因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富;其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。

　　(4)相同質量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個催化效果好?為什么?研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。

　　(5)滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時，可否共用下個吸管?為什么?不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實驗效果。

　　實驗六色素的提取和分離

　　1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素

　　各色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素

　　2、步驟：

　　(1)提取色素研磨

　　(2)制備濾紙條

　　(3)畫濾液細線：均勻，直，細，重復若干次

　　(4)分離色素：不能讓濾液細線觸及層析液

　　(5)觀察和記錄：結果濾紙條上從上到下依次為：橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。

　　考點提示：

　　(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?綠色、是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。

　　(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?

　　為了使研磨充分。不加二氧化硅，會使濾液和色素帶的顏色變淺。

　　(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?

　　溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶于水。

　　(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?

　　保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。

　　(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙?研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。

　　(6)濾紙條為何要剪去兩角?防止兩側層析液擴散過快。

　　(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線?因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結果。

　　(8)濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?防止色素帶的重疊;增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。

　　(9)濾液細線為何不能觸到層析液?防止色素溶解到層析液中。

　　(10)濾紙條上色素為何會分離?

　　由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。

　　(11)色素帶最寬的是什么色素?它在層析液中的溶解度比什么色素大一些?

　　最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。

　　(12)濾紙條上相互間距的是哪兩種色素?胡蘿卜素和葉黃素。

　　(13)色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?

　　第一條色素帶，因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。

　　實驗七觀察質壁分離和復原

　　1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡

　　2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡)，質量濃度0.3g/mL的'蔗糖溶液，清水等。

　　3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側滴蔗糖溶液，另一側用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小，顏色由淺變深，原生質層與細胞壁分離)→蓋玻片一側滴清水，另一側用吸水紙吸引→觀察(質壁分離復原)

　　4、結論：細胞外溶液濃度>細胞內溶液濃度，細胞失水質壁分離

　　細胞外溶液濃度<細胞內溶液濃度，細胞吸水質壁分離復原

　　知識概要：制片觀察加液觀察加水觀察

　　考點提示：

　　(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?

　　紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈，使視野變暗些。

　　(2)洋蔥表皮應撕還是削?為何?表皮應撕不能削，因為削的表皮往往太厚。

　　(3)植物細胞為何會出現質壁分離?動物細胞會嗎?當細胞失去水分時，其原生質層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性;動物細胞不會發生質壁分離，因為動物細胞沒有細胞壁。

　　(4)質壁分離時，液泡大小和顏色的變化?復原時呢?

　　細胞發生質壁分離時，液泡變小，紫色加深;當細胞質壁分離復原時，液泡變大，紫色變淺。

　　(5)若發生質壁分離后的細胞，不能發生質壁分離復原，其原因是什么?

　　細胞已經死亡(可能是外界溶液濃度過大，細胞失水過多或質壁分離時間過長)

　　(6)高倍鏡使用前，裝片如何移動?

　　若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向左方移動，因為顯微鏡視野中看到的是倒像。

　　(7)換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調亮?換高倍物鏡后，應調節細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗，可調大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。

　　(8)所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數的關系?目鏡越長，放大倍數越小;物鏡越長，放大倍數越大。

　　(9)物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數的關系?

　　物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數越大。

　　(10)總放大倍數的計算方法?放大倍數具體指面積的放大倍數還是長度的放大倍數?

　　總放大倍數等于目鏡放大倍數與物鏡放大倍數的乘積;放大倍數是指細小物體長度或寬度的放大倍數。

　　(11)放大倍數與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系?

　　放大倍數越大，視野中細胞越大、數目越少、視野越暗。

　　(12)更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上;更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動載玻片，若異物移動，則異物在載玻片上。

　　(13)怎樣利用質壁分離現象來測定植物細胞液的濃度?①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片③用顯微鏡觀察某植物細胞是否發生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。

　　生物實驗報告 5

　　本學期第一次月考已經結束，現將考試情況做如下分析：

　　一、基本情況：

　　本次月考試卷共有四個大題，考試內容為第五單元第一、二章和第三章，最高分分，最低分分，平均分，及格率，優秀率。此次考試包括選擇題、連線題、識圖題和實驗探究題。題型難易適當，符合新課程考核要求，且試題涉及的內容廣泛，有課本內的，也涉及到課本外的知識。主要考查學生的觀察能力、分析能力、綜合能力及語言表達能力。

　　二、試卷結構及試題賦分。

　　1、試卷的試題難易比為7：2：12、基礎知識和基礎技能考題內容占75%左右。

　　3、試卷結構較合理，難度適中，既考核學生對生物基礎知識和基本技能的掌握，同時也考查評價了學生的情感、態度、價值觀及學生的綜合應用能力，符合八年級學生的認知規律和能力梯度。

　　三、根據閱卷及考生成績情況分析：

　　第一大題單選題15分：考察基本概念和知識技能及學生身邊生活經驗知識，失分主要在1、3、7、9、11等小題上。第二大題連線題10分，學生失分率較低，失分主要集中在2小題上，對于先天性行為和學習行為概念掌握不夠清晰。第三大題識圖題17分，失分較多的為第2題主要是學生對課本基礎知識掌握不牢，把生物知識應用到生活經驗上的能力較差。第四大題為實驗探究，在此次考試本題作為送分題，題目比較簡單，從本次考試結果來看，本題得分率在90%以上，達到了預期的目的。

　　四、對今后教學的反思。

　　1、教師要在平時多用教法激發學生學習生物的興趣，要重視“雙基知識”，即基礎知識和基本技能還要加強。

　　2、教師在教學中多和學生交流合作，把書本知識和生活經驗多聯系，要重視培養學生收集資料歸納分析能力，訓練語言表達能力。

　　3、教師注要重課本基礎知識點的教學，做好識圖填空題型。注重培養學生的實驗探究能力和應用知識的能力。

　　4、學生的錯別字較多，教師要加強文字的書寫，尤其是一些概念或名稱中不經常使用的'文字的書寫。

　　5、教師在生物教學中要多重視過程教學及實驗教學，把平時的形成性評價做到實處，分組實驗及實驗習題要做認真，實驗報告都要認真填寫。養成學生觀察事物的習性及分析歸納能力，培養創新思維的能力，使教學水平更上一層樓。

　　八年級生物實驗教學計劃

　　新的學期開始了，新學期有新的打算。對于我來說，這學期將是一個關鍵而忙碌的學期。

　　之所以說是一個關鍵而忙碌的學期，是因為我區八年級生物、地理要參加中考，我們不但要學習八年級下冊的知識，還要對四冊書進行全面系統的復習，這學期時間又短，所以我們面臨很大的挑戰。除了做好自己的本職工作外，還要利用一切可利用的時間進行學習，提高自己的業務能力。為了更好的利用時間，合理的安排教與學的進度，現對本學期做如下計劃。

　　一、調整教學思路，提高學生成績;。

　　關于生物、地理等科目，學校一貫不夠重視，而這學期則不同，每周安排三課時來教學，可見任務之重，所以應把提高學生的成績放在教學的首位。如果生物地理考不好，會影響到他們升初三后學習的動力。所以無論如何應盡自己的最大努力，督促每一個同學，不管結果怎樣，都要努力拼搏三個多月。但我認為要提高教學成績，最關鍵的是要調動學生學習的熱情，全身心的投入到學習中。正所謂：“知識是學會的，不是教會的。”所以在復習過程中，老師盡量少講或不講，讓學生充分的進行小組之間的合作、討論和學習。生物課的復習一般都是分為幾部分內容：

　　(1)知識點的歸納，這個可以讓學生課下整理;。

　　(2)知識點的分析，這個可讓學生分析，老師補充;。

　　生物實驗報告 6

　　一、實驗目的：

　　1、學會如何使用顯微鏡觀察細胞；

　　2、了解細胞的結構；

　　3、學會制作臨時裝片。

　　二、實驗材料：（實驗材料可換）松針、動物血液、動物神經細胞永久裝片

　　三、實驗用具： 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡（物鏡5X、10X、40X）

　　四、方法步驟：

　　1、制作松針的臨時切片：

　　（1）取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上，用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。

　　（2）將土豆切成條狀（截面約：0.5X0.5cm)取兩條，將一根松針夾在兩個土豆條之間，用刀片削成盡量薄的薄片，削時，手腕不動，靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數次。從中選取較薄的切片，置于載玻片的水滴上。

　　（3）從一側輕輕蓋上蓋玻片，不要產生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的.水滴，即完成臨時切片的制作。

　　2、觀察切片：

　　（1）取出顯微鏡，置于試驗臺上靠左的位置，打開光源。

　　（2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上，調整載物臺位置，使蓋玻片對準光源。

　　（3）使用5X物鏡觀察切片，使松針切片在視野中心，換成10X物鏡，觀察松針葉面橫切結構。

　　（4）換成40X物鏡觀察，注意細胞及細胞內物質結構，畫圖。

　　3、動物血液臨時裝片的制作及觀察（除了不用切片，其他類似）

　　4、 動物神經細胞永久裝片的觀察。

　　五、反思：

　　1、松針的葉面結構是什么樣的？

　　2、動物細胞的結構是什么樣的？與植物細胞又什么不同？

　　3、顯微鏡的物鏡倍數愈大，視野的亮度如何？物體的大小如何？

　　4、如何調節焦距？

　　5、如何才能使切片盡量的薄？切片的厚薄對顯微鏡下觀察的效果有什么影響。

　　生物實驗報告 7

　　實驗目的

　　⒈學習并掌握動物細胞培養的無菌操作技術。

　　⒉了解原代細胞培養的基本方法及操作過程。

　　⒊學習細胞計數及營養液的配制。

　　實驗原理

　　⒈細胞原代培養

　　原代細胞培養是指直接從動物體內獲取的細胞、組織和器官，經體外培養后，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經消化，分解成單個游離細胞，在人工培養下，使其不斷的生長及繁殖。

　　細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實驗技術。要使細胞能在體外長期生長，必須滿足兩個基本要求：一是供給細胞存活所必須的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環境酸堿度與滲透壓的調節。二是嚴格控制無菌條件。

　　⒉細胞死活鑒定死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理，但無論采用何種辦法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質上的差異。

　　染色法分化學染色法和熒光染色法，根據染色機理的不同，染料或使死細胞著色，或使活細胞著色。

　　死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括：

　　☆死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過；而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。臺盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的'染色機理。植物細胞的質壁分離也可鑒定死活。

　　☆死活細胞在代謝上的差異：是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型，因此美藍染色后活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的無還原能力或還原能力極弱，使美藍處于氧化態，從而被染成藍色或淡藍色。

　　除此之外，還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細胞中，細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用，如甲基藍-中性紅混合染色法。

　　實驗用品

　　⒈材料小白鼠

　　⒉試劑

　　臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液（含生長因子）

　　⒊器材

　　剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學顯微鏡、倒置光學顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板

　　實驗步驟

　　⒈取材

　　取小鼠一只，采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉入超凈工作臺內的解剖盤中，無菌操作打開腹腔，取出其脾臟，除去其周圍的脂肪組織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉入無菌培養皿中待用。

　　⒉分離脾細胞

　　用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。

　　吸取上述分離的單個脾細胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。⒊培養脾細胞

　　取塑料培養皿一套，用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中，并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍（200ul）吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細胞，吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培養箱中培養。

　　⒋配制染液

　　用生理鹽水配成5%臺盼藍染液，備用。⒌染色

　　取0.5mL細胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液。混合。2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀察死活情況，注意不要有

　　氣泡產生，放大倍數為10x10。染色后活細胞不著色，死細胞顯示藍色。注意染色時間不能超過15min，否則染液將細胞毒殺。

　　⒍計數

　　在10x10倍的顯微鏡下觀察，計算血細胞計數板的4個4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線者計上不計下，計左不計右。

　　⒎計算細胞活力

　　根據公式：細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%

　　實驗結果

　　臺盼藍染色后的細胞（10x10）伊紅染色后的細胞（10x10）

　　總細胞數和活細胞數統計表（10×10）

　　項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個/ml活細胞數個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論

　　⒈結果分析

　　本次實驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%，并不算高，分析得應有以下原因可能影響實驗結果（包括誤差）：

　　⑴若在無菌操作的過程中操作不規范，導致染菌，會極大的影響觀察，導致實驗失敗。

　　⑵若在離心分離呈單細胞的過程中離心機轉速過快或時間過長很可能會導致細胞破裂，導致小鼠脾細胞大量死亡。

　　⑶染色時間過長，或觀察時間過長都會導致染色試劑將細胞殺死，使細胞活力驟降，這是導致細胞活力比較低的重要原因。

　　⑷實驗中的一些操作不正確或不規范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導致實驗誤差。

　　⒉注意事項

　　⑴嚴格進行動物消毒，需用75%酒精消毒。

　　⑵嚴格進行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學物質污染。

　　⑶吸取液體前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液體時，避免碰撞。

　　⑷離心管入臺前，管口、管壁應消毒。

　　⑸實驗者離開超凈臺時，要隨時用肘部關閉工作窗。

　　⑹器材使用時既要注意用火焰消毒，又要防止燙傷、燙死細胞。

　　生物實驗報告 8

　　年級班實驗人：組次：試驗時間：

　　一、探究目的

　　1、通過探究，了解細菌和真菌的生活環境。

　　2、學會培養細菌和真菌的'一般方法。

　　二、探究步驟

　　1、發現并提出問題：______________________________________ 。

　　2、作出假設：___________________________________________________ 。

　　3、制定計劃：

　　4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。

　　5、得出結論：_________________________________________________________ 。

　　6、表達交流。

　　三、討論

　　1、為什么培養皿和培養基在接種前必須高溫處理？為什么要用無菌棉棒？

　　2、什么環境條件下不可能有細菌和真菌？

　　扦插材料的處理

　　年級班實驗人：組次：試驗時間：一、

　　探究目的

　　通過探究，知道進行扦插繁殖的條件。

　　2、掌握扦插的基本方法和步驟。

　　二、探究步驟

　　1、發現并提出問題：______________________________________ 。

　　2、作出假設：___________________________________________________ 。

　　3、制定計劃：

　　4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。

　　5、得出結論：_________________________________________________________ 。

　　6、表達交流。

　　三、討論

　　1、在你對扦插材料的選擇和處理中，有哪些經驗和教訓？

　　2、在進行扦插繁殖時為什么往往要選擇帶有芽和幼葉的枝條作為插條？

　　生物實驗報告 9

　　一觀察洋蔥表皮細胞

　　實驗目的：通過觀察洋蔥表皮細胞，說明植物體是由細胞組成的實驗材料：顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實驗步驟：

　　（一)制做臨時裝片。

　　（1）用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。

　　（2）用液管在載玻片上滴一滴清水。

　　（3）用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。

　　（4）將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中，用針將其展開。

　　（5）用鑷子夾住蓋玻片，先將一邊接觸載玻片的水滴邊經再慢慢把蓋玻片放平，制成臨時切片。

　　（4）在蓋玻片的翼側滴加稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引，使染液浸潤標本的全部。

　　（二）安裝臨時裝片：將臨時切片放到顯微鏡上，調整顯微鏡與臨時切片位置，直到可以觀察到清晰的圖像為止實驗圖像：

　　200倍800倍

　　實驗結論：洋蔥表皮是由無數細胞構成的，有明顯的細胞核，細胞壁，細胞質出現。

　　二．觀察人的口腔上皮細胞的實驗教案

　　1、學習要求：

　　1.制作和觀察人的口腔上皮細胞臨時裝片。2.認識人的口腔上皮細胞的基本結構。

　　2、材料用具：

　　生理鹽水，稀碘液，消毒牙簽，滴管，紗布，鑷子，吸水紙，載玻片，蓋玻片，顯微鏡。

　　3、實驗方法和步驟：

　　1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。

　　3.用消毒牙簽在口腔內側壁輕刮幾下放在生理鹽水中。

　　4.用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。

　　5.在蓋玻片的一側滴加幾滴稀碘液，用吸水紙在蓋玻片的另一側吸引，使碘液浸潤標本的全部。

　　總結步驟：

　　擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細胞

　　三．測定某種食物中的能量

　　實驗目標一顆花生種子含有多少能量？

　　實驗器材或藥品 水

　　實驗探究過程 現象

　　分析及結論

　　1、在錐形瓶中裝30ml水

　　實驗前水溫：

　　2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃

　　針上

　　試驗后水溫：

　　3、在酒精燈上點燃花73℃、78℃、68℃

　　4.2J生并盡快把花生放到錐

　　溫差：×51×4.2=6300J

　　形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后，平均值：51.666℃

　　一顆花生種子約含有6300J

　　實驗結的能量論

　　四．探究饅頭在口腔中的變化實驗報告

　　一、問題的提出：取一塊饅頭放到口中咀嚼。口腔中的饅頭要經過牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細細品嘗這時的饅頭，你能嘗出一些甜味來。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關呢？如果有關，它們各起什么作用呢？饅頭變甜是否是淀粉發生了變化？

　　二、作出假設饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。饅頭變甜是因為淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成了帶有甜味的麥芽糖。在這個過程中，通過牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎，舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。

　　三、制定計劃（一）實驗原理

　　饅頭變甜應該是成分中糖類發生變化。饅頭的主要成分是淀粉，因此本實驗利用淀粉遇碘變藍的特性，以及口腔中的溫度為37℃的常識。控制變量唾液，以及模擬牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管，兩個對照實驗。一支試管作為實驗組，另兩支試管作為對照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液，滴入碘液后，實驗組的試管內沒有變成藍色，說明饅頭中淀粉的變化與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。如果變成藍色，則說明淀粉沒有被分解，饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒有關系。（二）實驗變量的控制

　　兩個對照實驗。一個對照實驗的實驗變量是唾液，實驗組內加入唾液2ml，對照組試管加入2ml清水。另一個對照實驗的實驗變量是饅頭塊的`狀態：實驗組的饅頭塊用刀切碎，放入試管中并震蕩試管，對照組的饅頭塊不做任何處理，直接整塊放入試管中，并且不震蕩試管。

　　（三）實驗方案實驗材料用具：饅頭塊（三小塊等大）試管（三支）燒杯（三個）盛唾液的小燒杯滴管溫度計石棉網三腳架碘液小刀小木板

　　1.取新鮮的饅頭，切成大小相同的A、B、C三小塊。將A塊和B塊分別用刀細細地切碎，拌勻（模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌），C塊不做任何處理。

　　2.用涼開水將口漱凈，口內含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后，用

　　干凈的鑷子取出棉絮，將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。

　　3.取3支潔凈的試管，分別編上（1）、（2）、（3）號，然后做如下處理：

　　將A饅頭碎屑放入（1）號試管中，注入2ml唾液并震蕩試管；將B饅頭碎屑放入（2）號試管，注入2ml清水并震蕩試管；將C饅頭放入（3）號試管，不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后，取出這三支試管，各滴加2滴碘液，搖勻。然后，觀察并記錄各試管中的顏色變化。四：實施計劃

　　按確定的探究計劃進行實驗，觀察實驗現象。可見，（1）號試管中沒有變成藍色；（2）號試管變成藍色；（3）號試管中的饅頭塊部分變成藍色。

　　五、分析實驗結果，得出結論

　　分析實驗現象，（1）號試管中滴入碘液后，沒有變成藍色，說明試管中已經沒有淀粉，淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了，麥芽糖沒有遇碘變藍的特性，所以滴入碘液后不變藍。（2）號試管中加入的是清水和饅頭碎屑，水沒有消化淀粉的作用，因此，滴入碘液后，饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍色。（3）號試管中只有部分變成藍色，說明饅頭與唾液的接觸不充分，只有部分淀粉被分解。由此，得出結論：說明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關系。因為上述活動模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌，（1）號試管中的饅頭接觸到了足量的唾液，并被消化。

　　生物實驗報告 10

　　實驗名稱：

　　觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗目的：

　　1、學習制作洋蔥表皮玻片標本。

　　2、學會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮，用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細胞。

　　3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。

　　實驗重點：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗難點：

　　正確使用顯微鏡。

　　實驗準備：

　　分組實驗器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實驗過程：

　　一、導入課題

　　出示洋蔥。問：如果從它的內表皮上揭下一塊，用顯微鏡來觀察能看到些什么呢？（板書課題）

　　二、制作洋蔥表皮玻片標本

　　1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。

　　（1）在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水；

　　（2）用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個“井”字，用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央，注意標本要平展開，不能折疊；

　　（3）用蓋玻片傾斜著蓋到標本上面，放蓋玻片時，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有氣泡。如水不足，可沿蓋玻片邊緣滴加；若水分過多，可用吸水紙吸掉；

　　（4）從蓋玻片的'一邊滴一滴稀釋的碘酒，并把玻片微微傾斜，再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水；

　　（5）洋蔥表皮玻片標本做成可進行觀察。

　　2、學生以組為單位自制玻片標本（最好制三份裝片，便于下面的對比觀察），教師巡視指導（教育學生注意安全）。

　　三、觀察洋蔥表皮細胞

　　1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內容畫在科學記錄本上。

　　2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內容畫到科學記錄本上。

　　3、學生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么？它們有何不同？

　　4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　（1）、出示顯微鏡，引導學生認識顯微鏡，簡介各部分的名稱、功能及使用方法，學生每5人一組操作熟悉顯微鏡。

　　（2）、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。（師操作演示：安放――對光――上片――調焦――觀察。生一步步跟著操作。）

　　（3）、學生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細胞。教師巡視指導，各組的實驗組長監督組員操作是否規范，要求每個人都要操作、都要觀察，并將觀察結果進行交流。組長將大家在顯微鏡下的發現畫到科學記錄本上。

　　5、全班交流在顯微鏡下的發現。

　　（1）各組推薦發言代表談自己的發現。

　　（2）各組將所畫的觀察結果向全班展示。

　　（3）交流討論評價。

　　6、師小結：我們發現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多，更清楚。我們發現洋蔥表皮是由一個個比較規則的多邊形組成的，而且大多呈長方形，外為細胞壁，內為無色細胞質和細胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結構，就是洋蔥的細胞。（師一邊描述一邊畫洋蔥細胞簡圖）

　　四、實驗結束。

　　回收實驗器材，整理實驗桌。

　　生物實驗報告 11

　　實驗名稱：

　　用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動

　　一、實驗目的

　　1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

　　2.觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布

　　二、實驗原理

　　高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的`正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。

　　三、材料用具

　　蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆

　　四、實驗過程（見書Ｐ30）

　　1．制作蘚類葉片的臨時裝片

　　2．用顯微鏡觀察葉綠體

　　3．制作黑藻葉片臨時裝片

　　4．用顯微鏡觀察細胞質流動

　　物理實驗報告 ·化學實驗報告 ·生物實驗報告 ·實驗報告格式 ·實驗報告模板

　　五、討論

　　1．細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動，為什么？

　　2．葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系？

　　3．植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態，這對于活細胞完成生命活動有什么意義？

　　4．用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。

　　生物實驗報告 12

　　一、實驗名稱

　　用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動

　　二、實驗目的

　　1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

　　2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布

　　三、實驗原理

　　高等植物的葉綠體呈橢球狀，在不同的.光照條件下，葉綠體可以運動，改變橢球體的方向，這樣既能接受較多的光照，又不至于被強光灼傷。在強光下，葉綠體以其橢球體的側面朝向光源；在弱光下，葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此，在不同光照條件下采集的葫蘆蘚，其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。

　　四、材料用具

　　蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆

　　五、實驗過程（見書p30）

　　1、制作蘚類葉片的臨時裝片

　　2、用顯微鏡觀察葉綠體

　　3、制作黑藻葉片臨時裝片

　　4、用顯微鏡觀察細胞質流動

　　六、討論

　　1、細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動，為什么？

　　2、葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系？

　　3、植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態，這對于活細胞完成生命活動有什么意義？

　　4、用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。

　　生物實驗報告 13

　　甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表達

　　學生： 學號：

　　同實驗者：

　　<研究背景>

　　谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多種重要生理功能, 抗自由基和抗氧化應激作用, 保護細胞膜的完整性等。γ-GCS是植物細胞中GSH生物合成的限速酶, 可以調控GSH的生物合成量。GSH在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用, 說明γ-GCS也與植物抗逆過程密切相關。

　　實驗一 甘薯葉片RNA提取

　　一、實驗目的

　　1. 了解真核生物RNA提取的原理；

　　2. 掌握Trizol提取的方法和步驟。

　　二、實驗原理

　　Trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總RNA的試劑，在勻漿和裂解過程中，能在破碎細胞、降解細胞其它成分的同時保持RNA的完整性。TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的`主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（RNA酶）。0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與氯仿聯合使用可增強抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失，導致細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后，RNA處于水相中，將水相轉管后用異丙醇沉淀RNA。用這種方法得到的總 RNA中蛋白質和DNA污染很少。

　　三、實驗材料

　　1. 材料

　　甘薯（Ipomoea batatas Lam）葉片，品種為徐薯18

　　2. 試劑

　　① 無RNA酶滅菌水：加入0.01%的DEPC，處理過夜后高壓滅菌；

　　② Trizol試劑；

　　③ 氯仿；

　　④ 異丙醇、75％乙醇；

　　⑤ TBE緩沖液；

　　⑥ 上樣緩沖液（6×）

　　3. 儀器

　　高壓滅菌鍋、微量移液器、臺式離心機、超凈工作臺、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統、1.5mL塑料離心管、槍頭和EP管架

　　四、實驗方法

　　1. 將葉片取出放入研缽中，加入適量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物葉片加入1 mL Trizol試劑，室溫放置5 min，使樣品充分裂解；

　　2. 每1 mL Trizol試劑加入200 μL氯仿，用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相；

　　3. 4℃ 12,000 rpm 離心15 min，吸取上層水相轉移到新管中；在上清中加入等體積冰冷的異丙醇，室溫放置15 min；

　　4. 4℃ 12,000 rpm 離心10 min，棄上清，RNA沉淀于管底；

　　5. RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇（用RNase-free水配制），溫和震蕩離心管，懸浮沉淀； 4℃ 8,000 rpm離心2 min，棄上清；

　　6. 室溫放置10 min晾干沉淀；

　　7. 沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O，輕彈管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存；

　　8. 用1%的瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，用EB染色并照相。

　　五、實驗結果

　　1. RNA提取結果

　　依照Trizol 試劑盒方法，提出的RNA較少，此部分未以圖或數據顯示。

　　2. RNA后電泳結果

　　如圖1. 其中9a為本組實驗結果。由圖可知RNA條帶非常模糊，拖尾現象嚴重，幾乎無法分清具體條帶，亮度較大。點樣孔附近的紅色部分為雜質，在提取過程中并未很好除去。

　　圖1. RNA提取跑膠結果。其中1泳道為樣品Marker，9a泳道為本小組RNA樣品。與標準對照可見條帶模糊，拖尾現象嚴重。

　　六、分析與討論

　　1. RNA的提取

　　產量并不多，可能是因裂解樣品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。在實驗過程中，由于對操作時間的掌握不熟練、操作技巧不完善，留上清與棄上清時令RNA損失了部分，使最終RNA產量不理想。

　　2. RNA電泳結果

　　有EB存在時，電泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外燈下應看得很清楚，另出現條由tRNA，5.8S rRNA和5S rRNA組成的較模糊、遷移較快的帶。如果

　　RNA沒有降解，則28S rRNA的亮度應為18S rRNA的2倍，且這兩條帶都無彌散現象發生。由圖1. 9a可知，RNA拖尾現象嚴重，說明RNA已大部分被降解；此外點樣孔附近出現紅色部分雜質，分析可能有并未除盡的蛋白質，同樣影響RNA電泳結果。

　　在進行實驗時，本小組成員未嚴格戴上口罩并勤換手套，這可能使外源

　　RNAase進入樣品，導致其降解嚴重。另外，提取出RNA后本小組未立即將樣品放入-70℃保存，也為導致結果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中，由于水相吸取過多，摻雜入部分蛋白質雜質而未于后續純化步驟除盡，RNA條帶拖尾嚴重可能還受該蛋白質影響。

　　七、總結：

　　本次試驗RNA提取非常失敗，從跑膠結果可見其降解嚴重。雖然大實驗無法避免試劑交叉污染的可能性，且電泳用膠的質量也會影響實驗結果，但從圖

　　1. 2a，3a，2b等條帶較為清晰的小組實驗結果可知，瓊脂糖凝膠質量以及試劑對結果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現了很大失誤。首先口罩、手套應該嚴格按規定佩戴，提取過程對移液槍等儀器使用需謹慎仔細，盡量避免混入雜質。其次為排除部分雜質影響可對RNA樣品用紫外線分光光度計測定吸光值檢驗，將有助于結果分析。最后，細節決定成敗，我們應汲取教訓避免接下來的實驗出現類似問題。

　　實驗二 第1鏈cDNA的合成和模板的驗證

　　一、實驗目的

　　1. 掌握第1鏈cDNA的合成方法和步驟

　　二、實驗原理

　　真核生物基因多為斷裂基因，編碼區不連續，需經轉錄后加工才能成為成熟mRNA。以真核成熟mRNA為模板合成cDNA，進而獲得有連續氨基酸編碼的DNA序列，無需轉錄后加工，即可在原核細胞中表達。

　　真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。引物：Oligo dT（12-18個T）。莫洛尼

　　氏鼠白血病毒逆轉錄酶（M-MLV ）以單鏈RNA為模板，在引物的引發下合成與模板互補的DNA鏈（cDNA）。

　　mRNA 反轉錄生成的cDNA可作為PCR的模板進行擴增稱為RT-PCR，RT-PCR比Northern雜交更靈敏，對RNA的質量要求較低，操作簡便，它是在轉錄水平上檢測基因時空表達的常用方法。

　　三、實驗材料

　　1. 材料

　　徐薯18葉片RNA樣品

　　2. 試劑

　　① dNTP mixture（10 mM each）；

　　② Oligo (dT) Primer (10 μM)；

　　③ Total RNA；

　　④ RNase free ddH2O；

　　⑤ M-MLV 反轉錄酶；

　　⑥ 5×First-strand Buffer；

　　⑦ 0.1 M DTT；

　　⑧ Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)

　　3. 儀器

　　10μL 和100μL 的移液槍、0.5mL的EP管、PCR儀等

　　四、實驗方法

　　1. 在RNase free Microtube 管中配制下列混合液：

　　dNTP mixture（10 mM each）1 μL

　　*Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μL

　　Total RNA2 μL

　　生物實驗報告 14

　　【探究內容】

　　探究種子萌發的環境條件

　　【探究目的】

　　１、了解種子萌發需要的環境條件。

　　２、學會進行探究實驗的一般方法。

　　【探究器材】

　　種子100粒、5個能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個、餐巾紙10張、標簽紙5張

　　【探究過程】

　　提出問題：光的強弱會對種子萌發產生影響嗎？水的多少會對種子的萌發產生影響嗎？溫度的`高低會對種子萌發產生影響嗎？空氣的流通會對種子萌發產生影響嗎？

　　做出假設：光的強弱、水的多少、溫度的高低都會對種子的萌發產生一定的影響。

　　制定計劃：準備100顆綠豆種子，5個有蓋的瓶子，10張紙巾，5張便利貼。1號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在空氣流通，有陽光的地方；2號瓶的水不但能濕透紙巾，而且能把種子淹沒，放在空氣流通，有陽光的地方；3號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，用蓋子把瓶子蓋上，使瓶子空氣不能流通；4號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在冰箱里，盡量使瓶子里的水不結冰；5號瓶不放水，放在空氣流通，有陽光的地方。

　　實施計劃：每天都進行實驗并觀察5個瓶子有什么變化，再把每天的變化都紀錄下來。

　　分析結果：1號瓶大部分能發芽；2號瓶的種子皮破了，但不能發芽；3號瓶只有少許發了芽；4號瓶和5號瓶沒有發芽

　　得出結論：想要種子發芽，一定要有適宜的光度；需要適量的水分，溫度也要控制好，空氣的流通也有一定的影響，但影響沒有光度、水分和溫度大，相對來說，空氣流通的影響較小。

　　這個實驗很簡單，我們在做實驗要分以上幾步完成，就會很容易的完成實驗。

　　【交流與評估】

　　1、根據你的問題和假設，應當將種子分成幾組？XX每組應有多少粒種子？XX每組只有一粒種子可以嗎？

　　2、對照組應提供的溫度、水分、空氣等條件應該如何？

　　3、每個實驗組的處理，除了所研究的條件外，其他環境條件是否應與對照組相同？

　　生物實驗報告 15

　　植物生物學是高等院校生物技術專業的一門基礎課，是一門實踐性很強的課程[1]，是生物技術專業的學生進入大學后首先接觸的專業基礎課，是學好細胞生物學、遺傳學、藥用植物學、細胞工程、植物組織培養實驗等課程的基礎。該課程包含了植物學與植物生理學等學科的內容，與植物學課程相比，內容比較廣泛。而植物生物學課程必須通過實驗和野外實習環節進行鞏固。植物生物學實驗是一門以實驗為基礎的研究植物生命活動的現象、規律及其本質的科學。下面就筆者多年來在植物生物學及實驗教學上的經驗談談植物生物學實驗的教學改革。

　　一、植物生物學實驗教學中存在的問題

　　1.教學設備不足。由于是地方本科院校的新建專業，而且開設的時間較短，設備相對不足，有時儀器套數不能滿足學生數，必須將學生進行分組，否則不能滿足每一名學生一臺儀器。另外，實驗室內缺乏多媒體設備，不能采用進行PPT進行講解，視頻也不能播放給學生看，只能在理論課上彌補。

　　2.研究性、綜合性實驗較少。以前的植物生物學實驗，大多數是驗證性的實驗，如植物細胞結構、植物各組織、器官的觀察，而研究性、綜合性或創新性實驗較少。驗證性實驗雖然能鞏固所學知識，但是不利于學生思維的開發，也不能激發學生的興趣。

　　3.實驗教學考核和教學方法不完善。實驗考核一般是：實驗操作+實驗報告，但是考核實驗操作比較少，而是比較注重實驗報告。有時實驗報告是將在顯微鏡下所看到的圖片畫在實驗報告上，學生為了完成實驗報告去臨摹課本上的圖，學生動手能力得不到發展，反而會使學生養成不良的習慣。在教學方法上，教師一般是先準備好各種材料，讓學生按照教師或課本上的實驗步驟進行操作，這樣，學生按照既定的步驟，按部就班地進行實驗，養成了依賴教師和教材的習慣，分析問題和解決問題的能力受到限制。

　　二、植物生物學實驗教學改革途徑

　　1.將植物生物學實驗單獨設課。將植物生物學實驗教學附屬于理論課之下，存在一定的不足，因此將實驗課改為一門單獨的課程，這也順應學校建設應用型本科院校的目標。要達到這樣的目標，必須增加實踐課程。把植物生物學實驗列為單獨的一門課程，既增加了實驗課時，也使學生的動手能力得到加強。

　　2.優化整合實驗教學內容。首先，根據植物學學科發展的要求，結合中學生物教學，將有關實驗內容做了相應的調整和補充，并對相關的實驗項目加以優化整合，將原來的實驗項目根據人才培養方案和教學大綱要求做了適當合并、整合，分成必做、選做和自主實驗三類，并根據認知原理，將實驗項目劃分為驗證性、綜合性和創新性三個層次。其次，根據學科發展需要，增加實驗內容，引導學生開展研究性學習。如根據中學生物的教學特點，增加了種子萌發動態過程的觀察，根據植物學科的發展，增加了被子植物莖、葉生長動態的觀察，植物生態、群落多樣性的觀察等。再次，將教師科研課題整合進實驗項目，引導學生開展創新性實驗。

　　3.加大資金投入。學校應加大對新建專業的投入力度，在儀器購買及師資上應適當傾斜，以建設好新設置的專業。儀器設備充足后，可以對整個班級進行教學，而不需要分組，這樣可以減少教學次數，減少教師的工作量。目前，大多數人認為實驗室不必建設多媒體，其實實驗室也必須像一般教室那樣建設多媒體，將實驗中相關的理論、技術給學生進行講解，使教學更加形象、生動和直觀。

　　4.采用直觀化教學方法。利用多媒體教學手段和技術，使學生突破時空限制直觀了解植物的自然形態和變化規律。充分利用大量的實物切片的顯微照片真實再現特定季節、特定區域、特定環境下的植物解剖結構，使學生有條件了解和研究植物微觀世界的奧秘[4]。教學模式掛圖、動畫仿真模擬與錄像再現等多種教學手段與具體的實驗操作緊密結合，以其形象、生動、真實的信息輸入，加強了學生對實驗教學內容的理解和掌握。如：將實驗材料的切片直接投影于大屏幕，由指導教師結合實驗內容重點講解，幫助學生正確地判斷和準確定位，這種直觀的教學方法，使學生對微觀世界有身臨其境的感覺，不僅使學生對課堂理論知識有了深刻理解，也提高了學生對實驗教學的興趣，培養出學生的探索精神。又如：觀察細胞的有絲分裂和減數分裂過程時，采用動畫模擬形式將連貫的細胞分裂各個時期中染色體變化的'特點形象、生動地展示給學生，把學生觀察到的靜止的畫面與動態的細胞分裂過程聯系起來，使學生對細胞分裂的完整過程有了充分理解。

　　5.增加綜合性及研究性實驗。驗證性的實驗要求學生掌握簡單的實驗操作，不利于學生思維的開發，因此在實驗教學中，增加綜合性的實驗，循序漸進地引導開展實驗。根據課程性質可將實驗劃分為基礎實驗和提高實驗兩個教學體系，根據學生的潛質分為基本型和提高型兩個層次，如培養洋蔥根尖，利用壓片法觀察有絲分裂過程，及分生組織的細胞特點和分布位置；自行設計實驗方案，比較和觀察不同成熟組織的細胞特點和分布位置；自行設計實驗方案，觀察、比較單雙子葉植物根的構造；測定植物的葉綠素含量；讓學生開展水培實驗等。

　　6.開設第二課堂。帶領學生游覽校園，初步認識一些植物；在此基礎上，讓學生采集校園植物標本，對校園植物進行檢索、分類，參與校園植物命名掛牌，牌上寫明植物的中文名、學名、形態特征、分布范圍和用途等方面的內容。由于校園是學生學習和活動的地方，方便學生認識和記憶植物的形態特征。這一措施大大提高了學生識別植物的效率和鑒定植物的能力。此外，在校外選擇了幾處植物種類較豐富的地區來充實教學實習資源。如帶領學生到澄碧湖水庫附近的山地開展現場式教學，讓學生采集和鑒定標本，加強學生對植物分類知識的鞏固。

　　7.設置植物野外實習。每年暑假，生物技術專業都要進行一年一次為期2周的植物野外實習，通過野外實習這個實踐教學環節，鞏固了所學的植物學分類知識，同時，增強了學生的團結友愛、互幫互助的精神，增進了學生之間及教師與學生之間的友誼。

　　8.指導學生開展科學研究。首先，鼓勵學生積極參加老師的科研課題，鼓勵和吸納學生參與老師學術研究，如學生參加教師的“全國第四次中草藥資源調查”的項目，讓學生掌握一些學科前沿知識。指導學生利用課余時間查閱文獻、整理資料，制定研究方案，開展科學研究，統計、分析科研數據，撰寫論文或綜述，并組織交流討論等。再次，指導學生自主開展科學研究、研究性學習和創新性實驗計劃項目、“挑戰杯”科技制作競賽等。

　　9.改革考核辦法。過去實驗考核方式是以實驗報告作為平時成績，占實驗總成績的70%；實驗操作的規范程度和實驗態度，占實驗總成績的30%。對于實驗的考核的改革，首先在所占的比例上進行改革，由原來以實驗報告為主的形式改為以實驗操作為主的考核方法，如實驗操作可占總成績的60%～70%，主要考核學生實驗操作的規范狀況、熟練程度，注重學生能力的考查。平時成績包括實驗出勤、實驗準備、預習報告、課堂紀律，實驗設計的合理性以及實驗報告成績等，占總成績的40%～30%。由以上兩項所構成實驗總成績占課程總成績的30%。指導教師通過口試面對面與學生交流，獲得學生對相關知識的掌握情況，給出其余70%的成績。在教學方法上，關注學生的實驗操作過程，發現并糾正問題。在課堂上可就有關的一些問題提問學生，可避免學生不認真預習。另外，可讓學生參與一部分實驗準備工作，可提高學生學習的積極性。每次實驗報告，均要求學生對實驗結果進行分析，提高分析和解決問題的能力。

　　三、結語

　　植物生物學實驗教學要適應應用型人才的培養，必須進行改革。優化和整合實驗教學內容，增加創新性實驗，采用直觀化教學方法，指導學生進行科學研究，完善考核方法。通過上述措施，不僅提高了實驗教學效果，而且有利于開發學生的思維，培養學生的創新精神，培養科研意識，提高學生分析問題、解決問題的能力[8]。然而實驗教學改革沒有止步，我們要不斷摸索，使實驗課內容和教學方法更能讓學生滿意。

　　生物實驗報告 16

　　一、實驗目的

　　初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1．還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。

　　斐林試劑由質量濃度為0.1 g／mL的`氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g／mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：

　　CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O

　　用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

　　2．蛋白質的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01 g／mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3．脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ 染成紅色

　　三、實驗過程（見書Ｐ18）

　　四、實驗用品（見書Ｐ18）

　　五、注意

　　1.關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3．蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B

　　六、討論

　　鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么？

　　生物實驗報告 17

　　探究目的

　　1、通過探究，加深對魚鰭在游泳中的作用的認識。

　　2、學會自制魚的模型代替魚進行探究，培養學生保護動物的意識。

　　一、探究步驟

　　1、發現并提出問題：______________________________________ 。

　　2、作出假設：___________________________________________________ 。

　　3、制定計劃：

　　4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。

　　5、得出結論：

　　_________________________________________________________ 。

　　6、表達交流。

　　二、討論

　　1、魚在游泳時，各個魚鰭起什么作用？

　　2、什么叫模擬實驗，與實驗法相比，模擬實驗的方法有哪些缺點和優點？

　　飼養和觀察蚯蚓

　　年級班實驗人：組次：試驗時間：

　　一、實驗目的

　　1、設置一個適合于蚯蚓生存的環境并飼養蚯蚓。

　　2、觀察蚯蚓的'外部形態。

　　3、觀察蚯蚓的運動。

　　二、實驗器材

　　活蚯蚓、玻璃板、粗糙的紙板、棉球、放大鏡、制作飼養蚯蚓裝置的材料用具。

　　三、實驗步驟

　　1、檢查調查用具是否齊全、完好。

　　2、創造一個蚯蚓的生存環境，并觀察蚯蚓的生活習性和食性。

　　3、觀察蚯蚓的外部形態。

　　（1）觀察它的身體是否分節。觀察它的環帶，區別它的前后端，數一數從蚯蚓前端到環帶共有多少節？

　　（2）用手觸摸蚯蚓體節近腹面處，你有什么感覺？

　　4、觀察蚯蚓的運動。

　　5、用手觸摸蚯蚓的體壁，感覺體表是否有黏液？

　　四、討論

　　1、蚯蚓適于在怎樣的環境中生活？它的生活習性是怎樣的？

　　2、身體分節的什么意義？蚯蚓的體節和剛毛在運動中起什么作用？

　　鳥適于飛行的特點

　　年級班實驗人：組次：試驗時間：

　　一、探究目的

　　1、通過探究得出鳥有哪些適于飛行的特點？

　　2、學會用多種方法探究鳥為什么能飛？

　　二、探究步驟

　　1、發現并提出問題：______________________________________ 。

　　2、作出假設：___________________________________________________ 。

　　3、制定計劃：

　　4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。

　　5、得出結論：_________________________________________________________ 。

　　6、表達交流。

　　三、討論

　　1、鳥所吃的食物經消化后形成的殘渣，1.5小時就隨糞便排出，這與飛行有什么關系？

　　2、鳥的心臟占體積的百分比較大，心博次數多，這與飛行有什么關系？

　　生物實驗報告 18

　　一、實驗目的

　　1、觀察植物細胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期。

　　2、初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。

　　3、初步掌握繪制生物圖的方法。

　　二、實驗原理

　　在植物體中，有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區細胞，高等植物細胞有絲分裂的過

　　程，分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍顯微鏡觀察植物細胞的

　　有絲分裂的過程，根據各個時期細胞內染色體（或染色質）的變化情況，識別該細胞處于有

　　絲分裂的哪個時期，細胞核內的染色體容易被堿性染料著色。

　　三、材料用具

　　洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養皿、鉛筆、質量分數為15%的鹽酸、

　　體積分數為95%的酒精、質量分數為0.01g/ml的'龍膽紫（或紫藥水）

　　四、實驗過程（見書Ｐ39）

　　1、洋蔥根尖的培養（提前3—4天）

　　2、解離：5min

　　3、漂洗：10min

　　4、染色：5min

　　5、制片

　　6、鏡檢

　　五、注意

　　1、解離充分是實驗成功的必備條件。解離充分，組織才能分散，細胞也不會重疊。

　　2、漂洗時間一定要足夠，否則細胞染不上色。

　　3、染色時，染液的濃度和染色時間必須掌握好。特別是染色不能過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。

　　六、討論

　　1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么？談談你自己的體會。

　　2、在觀察清楚有絲分裂各個時期的細胞以后，繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡圖，并標明時期。

　　生物實驗報告 19

　　一、實驗目的

　　初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1、還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。

　　斐林試劑由質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g／mL的'硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O

　　用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

　　2、蛋白質的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01g／mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3、脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色。

　　生物實驗報告 20

　　一、實驗目的初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1．還原糖的鑒定原理

　　生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。斐林試劑由質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g／mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)。

　　2．蛋白質的鑒定原理

　　鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的'是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01g／mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3．脂肪的鑒定原理

　　脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色

　　三、實驗過程（見書Ｐ18）

　　四、實驗用品（見書Ｐ18）

　　五、注意

　　關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3．蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B六、討論鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么？

　　生物實驗報告 21

　　一、實驗目的

　　1.初步學會探索酶的催化效率的方法。

　　2.探索過氧化氫酶和Fe3+催化效率的高低。

　　二、實驗原理

　　新鮮的豬肝中含有過氧化氫酶，Fe3+是一種無機催化劑，它們都可以催化過氧化氫分解成水和氧

　　三、材料用具

　　新鮮的'質量分數為20%的豬肝研磨液、滴管、試管、火柴、試管架、質量分數為3.5%的氯化鐵溶液、體積分數為3%的過氧化氫溶液。

　　四、實驗過程（見書Ｐ30）。

　　五、討論

　　實驗時為什么要選用新鮮的豬肝？在滴入豬肝研磨液和氯化鐵溶液時能否公用一個吸管？為什么？

　　生物實驗報告 22

　　一、實驗目的

　　（一）掌握一般培養基的制備原理及要求，掌握培養基酸堿度的測定，熟悉一

　　般培養基的制備過程和各種器皿滅菌方法。

　　（二）掌握細菌分離培養的基本要領和方法，掌握細菌抹片的制備方法和革蘭

　　氏染色法及油鏡的使用方法，并認識革蘭氏染色的反應特性。

　　（三）掌握學習用微生物學原理診斷疾病的一般方法及步驟。

　　二、實驗用品

　　（一）器材

　　量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養箱、水浴培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡

　　（二）試劑及材料

　　肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟

　　三、實驗步驟

　　（一）培養基的制備

　　（所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺內完成，并放在無菌操作臺內）

　　1、麥康凱培養基

　　（1）組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖

　　10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml

　　（2）方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調節

　　ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩

　　液混合，分裝于燒瓶內，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌

　　15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，加入結晶紫和中性紅水溶液，搖勻后

　　傾注平板。

　　注：結晶紫和中性紅水溶液配好后需經高壓滅菌。

　　2、血清平板

　　（1）組成：營養瓊脂、牛血清

　　（2）方法：將滅菌的營養瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時，加入牛血清，并

　　混勻，傾注平板。

　　注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。

　　3、lb培養基

　　（1）組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g

　　（2）方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，調節ph至7.4，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，傾注平板。

　　4、液體培養基（在lb培養基的基礎上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）

　　（二）病料取材

　　在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發現，則立即用消毒的器械對其進行生理解剖，觀察其病理特征現象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物，并注意組織的完整性，用儲物袋密封保存。

　　（三）細菌粗培養

　　1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　　2、接種

　　（1）在無菌操作臺酒精燈旁打開用儲物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右

　　手持剪刀，把病料剪出一個小口。

　　（2）右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭

　　開約20左右，然后將接種環前端插入小口旋轉一下后，再用劃線接種的.方法接種到一個血清平板上。

　　（3）用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記，并將平板倒放。

　　以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個血清平板。

　　3、培養：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。注：劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落，且劃線時接種環應盡量傾斜，以免劃破培養基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　　（四）細菌純培養

　　1、菌落特征判斷

　　待粗培養的細菌培養24小時后，取出用放大鏡觀察記錄單個小菌落的形態特征并用實驗報告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標記，其形態特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。

　　2、取單個菌落進行革蘭氏染色鏡檢

　　（1）取干凈的載玻片，用記號筆在其一面做好正反面標記，再在載玻片另一

　　面中央滴上一小滴蒸餾水。

　　（2）將接種環在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標記的單個小菌落中

　　取少許細菌置于蒸餾水中混勻（同時蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌，待冷卻進行染色。

　　（3）先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液

　　染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進行復染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。

　　（4）將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進行鏡檢，觀察其

　　形態特征，判斷細菌的種屬。

　　3、細菌接種培養

　　（1）消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對

　　無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　　（2）接種：右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將

　　平皿揭開約20左右，然后將接種環插入揭開的平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記，將平板倒放。

　　（3）將接種好的平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。

　　注：油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　　（五）菌液的制備

　　1、鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養的細菌。

　　2、分裝液體培養基：先對無菌操作臺及需要使用的器械進行消毒滅菌，然后用鉗子揭開一個空試劑瓶，用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內，并立即蓋上液體培養基大試劑瓶瓶塞。

　　3、接種：右手持接種環，用火焰對其進行滅菌，待冷卻后，取出純培養的平板，在無菌操作臺內酒精燈旁，蘸去少許細菌，左手傾斜液體培養基，將接種環，伸入液體培養基內攪動，然后取出對接種火焰環滅菌，并用滅菌的包裝紙捆綁好后，用記號筆做好相應標記，置于一旁。

　　4、培養搖菌：將接種好的液體培養基置于水浴培養箱中培養24小時。注：分裝一個培養基就接種一個培養基，不得全部分裝完后再一個一個接種。

　　（六）小鼠致病性實驗

　　1、保定：選擇健康的青壯年小白鼠，先用右手抓住尾巴，旋轉數周讓其眩暈，然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚，并翻轉左手，使其頭部朝下，以達到內臟前移的目的。

　　2、接種：先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒，再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。

　　3、觀察：將接種的小白鼠放在適宜的環境下生活，并在鼠籠處用記號筆標記好接種時間、菌種等。

　　4、再培養鑒定：待小白鼠死亡后，對其進行解剖，觀察其內臟病變情況，并取肝臟直接涂在相應培養基上，在適宜條件下反向培養24小時后，取菌落細菌進行鏡檢觀察判斷。

　　注：在注射小白鼠2小時候需要觀察小白鼠是否因注射時傷害到內臟而死亡。

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